高三生物复习：概观指导植物细胞工程

　　新华中学 王季明

　　三、深入和扩展

　　1.植物组培对光的要求

　　愈伤组织的培养： 首次培养——不需光

　　继代培养——需要光

　　试管苗的培育：进行见光培养

　　2.胚状体与根、芽

　　愈伤组织的形态发生主要有不定芽方式和胚状体方式两种。

　　①不定芽方式：通过营养物质和生物调节物质的适当配比，可以从愈伤组织诱导出芽和根的顶端分生组织，并可由此再生出新的植株。

　　②胚状体方式：愈伤组织培养物可以放在摇床上，通过试管液体悬浮培养分散成单细胞。这种单细胞具有丰富的细胞质、小型的液泡和大的细胞核，具有胚性细胞的特征，在适宜的培养基中可发育成胚状体，然后再继续发育成植株。这种从单个体细胞分裂、分化、发育成胚状体的过程，与受精卵分裂、分化和发育成胚的过程很相似。

　　3.原生质体培养

　　通过细胞壁的水解酶——纤维素酶和果胶酶除去细胞壁，获得分离的原生质体，然后通过原生质体培养也可产生再生植株。

　　一、知识主干

　　二、要点提示

　　1.植物体细胞杂交技术的起止点

　　起点：来自不同植物的体细胞A和体细胞B

　　终点：杂种植株

　　2.理论依据：

　　植物体细胞杂交技术由两部分组成，即植物细胞融合及植物组织培养。前者的理论依据是细胞膜具有一定的流动性，而后者则依据植物细胞的全能性。

　　3.酶解法去壁——制备原生质体：

　　根据酶的专一性原理，用纤维素和果胶酶去除细胞壁，为不同植物体细胞的原生质体融合扫除了障碍。

　　4.诱导原生质体融合的方法：

　　物理法：离心、振动、电刺激

　　化学法：化学诱导剂，例如聚乙二醇(PEG)

　　此诱导方法只实现了膜的融合，而细胞核的融合在杂种细胞第一次有丝分裂时方得以实现。

　　5.杂种细胞的筛选：

　　如图所示，诱导原生质体融合后，将原生质体转移到适当的培养基上进行培养，使原生质体再生出细胞壁。这时，在细胞混合物中不仅有AB型杂种细胞，也有A型、AA型、B型、BB型细胞，可采用机械方法、生理学或遗传学方法筛选出杂种细胞，并将其进一步培养成杂种植株。

　　6.杂种植株遗传物质的变化：

　　杂种植株的染色体数是两亲本细胞染色体数之和(结合遗传和变异的相关知识)。

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